AAV-293人胚腎細胞

【細胞貨號】    C0061

    【細胞縮寫】    AAV-293細胞

    【細胞名稱】    AAV-293(人胚腎細胞)

    【背景資料】    我們推薦使用AAV-293細胞株繁殖腺病毒相關(guān)重組病毒。AAV-293源自普遍使用的 HEK293細胞株，但產(chǎn)生的病毒滴度更高。跟HEK293細胞一樣，AAV-293細胞反式表達腺病毒E1基因，當共轉(zhuǎn)染三個AAV助質(zhì)粒(一個含ITR的質(zhì)粒，pAAV-RC和E1缺失助質(zhì)粒)時，可以產(chǎn)生有感染力的腺病毒-相關(guān)病毒顆粒。

AAV-293人胚腎細胞

 細胞培養(yǎng)常見問題及解決方案:

1)培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細胞極大可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決；2)細胞漂浮：培養(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以離心去掉，留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細胞生長至匯合度80%，進行消化傳代；如細胞還是不貼壁，將細胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導，直到問題解決；3)對于生長緩慢的貼壁細胞：可采用適當?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度，或隔日換液的方法來保證細胞的狀態(tài)和生長速度；4)對于生長不均的貼壁細胞：在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細胞分布明顯不均時(即某一區(qū)域細胞已重疊生長，而旁邊則為一塊空白)，此時可將細胞進行消化，重新打散，貼壁，加入新培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
細胞傳代注意事項：①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次進行一種細胞的操作。每種細胞使用一套器材；②每天觀察細胞形態(tài)，掌握好細胞是否健康的標準：健康細胞的形態(tài)飽滿，折光性好，生長致密時即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細胞有污染跡象，應(yīng)立即采取措施，一般應(yīng)棄置污染的細胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細胞的建系和維持：細胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細胞種子凍存來實現(xiàn)。對每一個細胞系來說都有其自身的特點，要做好建系的維持必須記錄好細胞檔案,換液傳代和做好細胞系的管理工作。培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-196℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞凍存的步驟：1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min，10分鐘)；2)去上清液，加入含20%小牛血清的*培養(yǎng)基，于4℃預冷15分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為5×106～1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中，每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-80℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在4℃，2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃，2h;-80℃，2h;放入液氮罐；5)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
A431細胞系保種中心；細胞生長特性：半貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
Y79細胞系保種中心；細胞生長特性：懸浮；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
NCI-H1703細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：1：3—1：6傳代，每周換液2—3次
L- cell細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞；細胞傳代方法：1：4-1：10傳代；2-3天換液1次。
HSAS2細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
CaSki細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
NCI-H1792[H1792]細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
JK(Jurkat)細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
3T3swiss細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
Calu-6細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞傳代方法：消化20分鐘。1：2。5-6天長滿。
LTEP-P細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
RPTEC/TERT1細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
NCI-H929細胞系保種中心；細胞生長特性：懸浮生長 ；細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞樣；細胞傳代方法：保持細胞密度在5×105—1×106 cells/ml之間，每周換液2—3次
NCI-H838細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：1：3-1：6傳代；2-3天換液1次。
FaDu細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：消化3-5分鐘。1：2。3天內(nèi)可長滿。
U266[U266B1]細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
D283med細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
Pt-K2(PtK2)細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
CAL-148細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
NCI-H498細胞系保種中心；細胞生長特性：半貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
COLO394[COLO394]細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
SHG44細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
NHEK細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2傳代
PK-15細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
NCI-H1755[H1755]細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
PIG1細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
Hs578bst細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁生長　；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2傳代
CaSki細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
LS 174T細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
NCI-H295R[H295R]細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
SHEE細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
CHL-1細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞傳代方法：1：6—1：10傳代
PE/CA-PJ34(Clone 12)細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：1：2傳代
Sall BclxL 50RFP細胞系保種中心；細胞生長特性：懸浮生長；細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞；細胞傳代方法：1：2傳代
D407細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁生長　；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2傳代
RIN-m細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
SW948[SW-948]細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
GRC-1細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
Hce-8693細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
NCI-H838細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：1：3-1：6傳代；2-3天換液1次。
JeKo-1細胞系保種中心；細胞生長特性：懸浮；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
HPDLF細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
HTMC細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
UMNSAH/DF-1細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：成纖維母細胞樣；細胞傳代方法：1：2傳代
NCI-H1648細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞傳代方法：1：3-1：6傳代
PC-3M-1E8細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
NCI-H2330[H2330]細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
MEG-01細胞系保種中心；細胞生長特性：懸浮；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
USMC細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
NCI-H1385[H1385]細胞系保種中心；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。