U343人源性膠質瘤細胞

懸浮細胞接收后的操作流程與注意事項
1.如簽收時出現培養瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯系實驗室 
2.擰松瓶蓋，細胞瓶豎立培養8h（或過夜）
3.待細胞沉底后吸除上層液體（含碎片殘渣，請小心操作），然后吸取沉底的細胞層（2ML左右轉移到新的培養瓶，加入新鮮的*培養基（如細胞狀態較差可將血清濃度調高到15%）繼續培養

U343人源性膠質瘤細胞

細胞處理方法：

一、貼壁細胞
1、 接收到細胞，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞 100X,200X 各一張）。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內打開外包裝。
3、嚴格遵循無菌操作規范，打開細胞培養瓶。
4、37度平衡1-2小時。
5、用移液管吸取培養基，到50ml離心管中，剩下細胞密度達到80%至90%可以傳代，如沒有達到添加6ml新鮮培養基繼續培養。
6、如果肉眼檢查上清有細胞，對50ml上清進行離心收集細胞，如果細胞連片狀態，棄掉上清對收集的細胞進行胰酶消化（1ml胰酶37度），接種培養。

二、懸浮細胞
1、接收到細胞，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞 100X,200X 各一張）。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內打開外包裝。
3、嚴格遵循無菌操作規范，打開細胞培養瓶。
4、細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒）。
5、1000rpm，5min 離心，用吸管小心吸出上清，加入培養基，重懸細胞。
6、將重懸好的細胞轉入六孔板或者細胞培養瓶種，加入新鮮培養基，置于 37℃，5%CO2 培養（大部分細胞）。